南京巴傲得生物科技有限公司

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重组蛋白表达纯化服务

3000+

哺乳表达项目

200+

稳转细胞株构建项目

80%+

大肠杆菌表达系统可溶表达率

3-7天

原核3天，真核1周交付

巴傲得提供从载体构建到蛋白质表达、纯化的一站式服务，我们拥有多种重组蛋白表达系统，包括昆虫细胞、哺乳动物细胞和原核蛋白表达系统，为客户提供高品质、低成本的活性重组蛋白，满足您的不同需求。

巴傲得提供从基因合成、载体构建到蛋白质表达、纯化的一站式服务，可以根据客户需求，选用不同表达/纯化标签、表达宿主等，真正为客户实现深度私人定制。多种纯化体系，为蛋白表达、纯化提供多种选择，帮助客户最大限度提高研究项目的成功率。

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重组蛋白表达服务类型

原核（E. coli）蛋白表达服务

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巴傲得生物利用HEK293表达系统构建了VLP技术平台，为客户提供膜蛋白定制服务，助力药物研发。

• 活性优，哺乳动物细胞表达，更接近真实构象

• 多应用，免疫、ELISA、SPR/BLI、PK/PD等

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哺乳动物蛋白顺时表达服务

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酵母系统表达服务

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昆虫系统表达服务

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稳定细胞株构建服务（HEK293/CHO)

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原核（E. coli）蛋白表达服务

大肠杆菌蛋白表达系统是目前应用最广泛，也是最经济实惠的蛋白表达系统。E. coli具有遗传背景清楚、细胞增殖快、表达量高、稳定性好和抗污染能力强等特点，适用于多种属蛋白的表达，尤其对小分子蛋白的生产具有极大的优势，但也存在一些问题，如易形成包涵体和含有内毒素等。巴傲得提供从密码子优化到重组蛋白表达/纯化的一站式服务以及内毒素去除等附加服务，以满足不同的定制需求。我们拥有丰富的E. coli 可溶性蛋白表达/纯化及蛋白复性经验，拥有多种E. coli细胞株和表达载体，可为客户提供优质的原核蛋白表达服务。

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E. coli 蛋白表达服务内容

1-2 周

基因合成及密码子优化

(可选)

客户提供目的蛋白的序列信息或质粒。
1-2 周

载体构建

• 克隆至合适的表达载体

• 质粒测序

• 质粒制备

交付内容

• 测序报告 (若客户要求)
1-2 周

表达鉴定和可溶性分析

• 10mL培养

• 3个表达条件尝试

• 蛋白表达评估 (SDS-PAGE)

交付内容

• 表达评估报告
2-3 周

放大表达和1-2步纯化

• 蛋白纯化 (可溶表达)

• 蛋白变性复性纯化 (包涵体)

• QC分析 (SDS-PAGE, UV等)

交付内容

• 0.5-1mg纯化蛋白样品 (如蛋白表达可行)

• 质量检验报告 (CoA)
2-3 周

大量表达及纯化

(可选)

• 100mg或更多蛋白

• QC检测

交付内容

• 纯化蛋白

• 质量检验报告 (CoA)

附加服务

为满足客户的特定需求，巴傲得生物还提供更加广泛的服务，包括：内毒素去除服务、标签去除服务、蛋白标记服务。

原核蛋白表达服务流程

双方沟通确定蛋白表达要求
签订技术服务合同并收取预付款
进行蛋白表达可行性实验
反馈蛋白表达可行性实验结果 / 寄送样品（如有）
根据可行性实验结果进行蛋白表达大量生产报价
根据客户要求进行蛋白的大量生产

大肠杆菌蛋白表达服务案例

可溶性蛋白纯化：目的蛋白His标签；分子量14kDa

Lane M: 8-180kDa
Lane 1:超声裂解后全菌
Lane 2:超声裂解后上清
Lane 3:过镍柱后流穿
Lane 4:20mM咪唑洗杂
Lane 5:50mM 咪唑洗杂
Lane 6:100mM 咪唑洗脱
Lane 7:250mM 咪唑洗脱

小试可溶性表达鉴定：目的蛋白分子量46kDa 优化表达温度、诱导剂浓度使其成为可溶性表达

Lane M: 8-180kDa
Lane 1:空白全菌
Lane 2:诱导全菌
Lane 3:诱导上清
Lane 4:诱导沉淀

原核蛋白表达的常见问题解答

什么是原核蛋白表达？

原核蛋白表达是指在原核生物（如大肠杆菌）中进行的蛋白质合成。通过将目标基因克隆到表达载体中，转化到宿主细胞后，利用宿主的翻译机制产生蛋白质。
选择哪种宿主细胞？

大肠杆菌（如BL21(DE3)）是最常用的宿主细胞，因其快速生长、基因组简单和表达系统成熟而受到广泛使用。选择宿主细胞时，还要考虑目标蛋白的特性，例如是否需要翻译后修饰。
3.重组蛋白是否会有翻译后修饰？

在原核系统中，通常缺乏翻译后修饰（如糖基化）。如果目标蛋白需要特定的修饰，考虑使用真核表达系统（如酵母、昆虫细胞或哺乳动物细胞）。